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產(chǎn)品展示

技術(shù)服務(wù)

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sequenom甲基化檢測

sequenom甲基化檢測

  • 所屬分類:分子及免疫實驗服務(wù)
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  • 發(fā)布時間:2022-02-15 14:53:41
  • 產(chǎn)品概述

產(chǎn)品介紹:

將待測DNA經(jīng)過亞硫酸鹽處理,通過PCR擴增過程引入T7啟動子序列,經(jīng)T7 DNA聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄過程得到各樣本RNA產(chǎn)物,經(jīng)堿基特異性酶切處理,得到RNA小片段,并用飛行質(zhì)譜檢測每個片段的分子量,EpiTYPER程序完成數(shù)據(jù)的自動化處理并報告每個檢測片段的甲基化程度。

技術(shù)優(yōu)勢

·   檢測片段長:擴增片段長度可達500bp

·   高靈敏度:可發(fā)現(xiàn)低至5%甲基化水平,樣本起始量低至10 ng。

·   重復(fù)性好:變異系數(shù)CV≤5%。

·   高性價比:用384孔板進行PCR反應(yīng),一個擴增產(chǎn)物可以進行多重CpG位點分析,無需后續(xù)驗證,可直接用于文章發(fā)表。

服務(wù)內(nèi)容

1. 根據(jù)客戶提供的序列信息進行預(yù)評估;

2. 進行樣本DNA的分離、純化、質(zhì)檢及亞硫酸鹽修飾。

3. 使用特殊設(shè)計的一對引物擴增樣本,得到帶有T7 RNA聚合酶啟動子序列的擴增產(chǎn)物。

4. 在體外轉(zhuǎn)錄體系中,利用T7 RNA聚合酶,將擴增產(chǎn)物轉(zhuǎn)錄為RNA片斷。

5. 利用RNase A能夠特異性識別并切割RNA中U 3’端的特性,將RNA片斷切割成攜帶有CpG位點的小片斷。

6. 使用sequenom?MassArray飛行質(zhì)譜分析系統(tǒng)檢測產(chǎn)物。由于同一片斷中,只有CpG和CpA之間16Da的分子量差別,即質(zhì)譜圖中兩者峰的差距。


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