螢火蟲熒光素酶底物按需分裝以避免反復凍融，-80 ℃ 避光保存，海腎熒光素酶底物現(xiàn)配現(xiàn)用。雙熒光素酶實驗實驗前各個組分（細胞裂解產(chǎn)物，底物工作液等）都需要恢復到室溫，實驗操作過程中注意避光，整個過程盡量在 30 min 內(nèi)完成，每個樣品需充分混勻，并且混勻次數(shù)和時間盡量保持一致。如果細胞裂解產(chǎn)物需要暫存，常溫不超過 6 小時，-20 ℃ 一個月，-80 ℃ 半年。首先排除轉(zhuǎn)染效率問題，12 孔板多鋪一孔細胞轉(zhuǎn)染熒光質(zhì)粒，觀察轉(zhuǎn)染的熒光效率，并設立陽性和陰性對照。排除轉(zhuǎn)染問題后，如果熒光讀值仍然較低，可以嘗試增加轉(zhuǎn)染質(zhì)粒量。
