游離期:細胞剛接種到新的培養(yǎng)容器中到貼壁前的一段時期,這個時期的長短由細胞類型決定,從幾分鐘到幾個小時不等。 貼壁期:細胞從游離狀態(tài)變?yōu)橘N附到培養(yǎng)器皿表面并展現(xiàn)出一定細胞形態(tài)的時期。天津組學實驗 潛伏期:細胞在完成貼壁后,并不會馬上進行增殖,會進行增殖所必須的物質和能量的儲備,這個時候稱之為潛伏期。 對數(shù)生長期:細胞在完成物質和能量儲備后,開始大量的增殖的時期。這個時期的細胞活力旺盛,且狀態(tài)穩(wěn)定,我們所做的絕大多數(shù)實驗都是在這個時期開展的。 停止期:隨著細胞的生長,細胞密度越來越大,由于營養(yǎng)物質的消耗、細胞間的接觸抑制等因素,細胞生長緩慢,甚至停止生長。這個時候,我們就要給細胞進行傳代了,使細胞可以繼續(xù)進行增殖,保持旺盛的活力。
細胞的培養(yǎng)所需要的營養(yǎng)成份一般來自于基礎培養(yǎng)基(比如DMEM培養(yǎng)基)和血清。
基礎培養(yǎng)基:主要是提供細胞生長所需要的氨基酸(組成蛋白質的基本單位)、維生素(細胞代謝中輔酶的組成成分)、無機離子(K+,Na+等)、碳水化合物(碳源和能量來源)和一些激素等營養(yǎng)物質 血清:主要是提供一些基礎培養(yǎng)基不能提供的生長因子和低分子的營養(yǎng)物質,此外它還有促進細胞的貼壁、中和有害重金屬離子等作用。
如果只提供基礎培養(yǎng)基而不提供血清,絕大多數(shù)細胞是無法生長的。血清對于我們實驗的重要性就不言而喻了,那么什么樣的血清才算是合格的血清呢?
合格的血清需要通過各種檢測,包括無細菌,無真菌,無支原體檢測,無病毒污染。血清一般呈現(xiàn)為淡黃色,透明狀液體,由于含有大量的蛋白質等成分,會略有黏稠。以全式金公司的TransSerum? EQ Fetal Bovine Serum (FS201-02)為例,它通過了牛腹瀉病毒、牛副流感病毒、牛呼腸孤病毒、狂犬病病毒、牛腺病毒、牛細小病毒和支原體的檢測,安全可靠。以澳洲健康胎牛血液為原料加工而成,經(jīng)3 次0.1 μm 微孔濾膜過濾,無支原體污染,內毒素水平極低。同時呢也適用于間充質干細胞的培養(yǎng)。下表列出了使用EQ血清培養(yǎng)過的部分細胞,供大家參考。