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利用熒光素酶與底物結(jié)合發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的特性，把感興趣的基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（fireflyluciferase）的上游，構(gòu)建成熒光素酶報告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細胞，適當(dāng)刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷刺激前后或不同刺激對感興趣的調(diào)控元件的影響。
同時，為了減少內(nèi)在的變化因素，比如：培養(yǎng)細胞的數(shù)目、細胞轉(zhuǎn)染和裂解的效率等對實驗準(zhǔn)確性的影響，將帶有海腎熒光素酶基因（Rinillaluciferase）的質(zhì)粒（phRL-TK）作為對照質(zhì)粒與報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細胞，提供轉(zhuǎn)錄效率的內(nèi)對照，使測試結(jié)果不受實驗條件變化的干擾。天津組學(xué)實驗
在測量過程中，首先加入熒光素酶檢測試劑LuciferaseAssay ReagentII時產(chǎn)生螢火蟲熒光信號，這樣先測量螢火蟲熒光素酶活性。定量螢火蟲熒光強度之后，再在同一樣品中加入Stop&GloReagent試劑，將上述反應(yīng)淬滅，并同時啟動海腎熒光素酶反應(yīng)，進行第二次測量，稱之為雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灐?/span>
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